Tehnika ispitivanja imunoapsorpcije povezanih enzima – na engleskom Enzyme-Linked Immuno Assay – ili ELISA test je imunološki test koji omogućuje otkrivanje ili analizu molekula u biološkom uzorku. Osmislila su ga i razvila dva švedska znanstvenika, Peter Perlmann i Eva Engvall na Sveučilištu Stockholm 1971. godine.

Molekule koje se analiziraju ELISA metodom općenito su proteini. A vrste uzoraka uključuju tekuće biološke materijale – plazmu, serum, urin, perspirant –, medije stanične kulture ili rekombinantni protein – protein koji proizvodi stanica čiji je genetski materijal promijenjen genetskom rekombinacijom – pročišćen u otopinu.

ELISA test se uglavnom koristi u imunologiji za otkrivanje i/ili mjerenje prisutnosti proteina, antitijela ili antigena u uzorku. Ovaj serološki test posebno otkriva antitijela koje tijelo proizvodi kao odgovor na virusnu kontaminaciju.

Primjena antitijela u dijagnostici zaraznih bolesti predstavlja specifičnu i brzu metodu. ELISA tehnika je imuno-enzimska tehnika koja omogućuje vizualizaciju, iz biološkog uzorka, reakcija između antigena – tijela koje živi organizam smatra stranim – i antitijela pomoću reakcije u boji koju proizvodi enzimski marker – općenito alkalna fosfataza i peroksidaza – prethodno spojene na antitijelo. Reakcija u boji potvrđuje identifikaciju izolirane bakterije ili prisutnost željenog virusa, a intenzitet boje daje indikaciju količine antigena ili antitijela u danom uzorku.

Postoje četiri glavne vrste ELISA testa:

• ELISA izravna, omogućuje otkrivanje ili mjerenje antitijela. Koristi samo primarno antitijelo;
• ELISA indirektna, koji se najčešće koristi, također omogućuje otkrivanje ili analizu antitijela. Koristi sekundarno protutijelo koje mu daje bolju osjetljivost od izravne ELISA;
• ELISA u konkurenciji, omogućuje doziranje antigena. Proizveden natjecanjem za veze, ne koristi enzim;
• ELISA «u sendviču», omogućuje doziranje antigena. Ova tehnika se obično koristi u istraživanju.

ELISA test se koristi za:

• Pronalaženje i mjerenje antitijela u serologiji za dijagnostiku zaraznih bolesti: virologija, parazitologija, bakteriologija i dr.;
• Doziranje proteina pri niskim koncentracijama: specifične doze određenih proteina plazme (imunoglobulin E (IgE), feritin, proteinski hormoni, itd.), tumorski biljezi, itd.;
• Dozirajte male molekule: steroidne hormone, hormone štitnjače, lijekove…

ELISA test se posebno koristi za dijagnosticiranje mnogih zaraznih bolesti:

Spolno prenosive bolesti (SPB)

Uključujući hepatitis, sifilis, klamidiju i HIV. Preporučeno od strane zdravstvenih tijela, to je glavni probirni test za AIDS: pokazuje prisutnost anti-HIV antitijela i p24 antigena šest tjedana nakon infekcije.

Regionalne ili endemske bolesti

Žuta groznica, Marburg virusna bolest (MVM), Ladengue, Lyme bolest, Chikungunya, Rift Valley groznica, Ebola, Lassa groznica, itd.

Covid-19

Za provedbu više od 2 do 3 tjedna nakon pojave simptoma, ELISA test omogućuje utvrđivanje prisutnosti anti-SARS-CoV-2 antitijela za manje od sat vremena.

Virusni patogeni koji uzrokuju prenatalne infekcije

Toksoplazmoza, rubeola, citomegalovirus, herpes simplex na primjer.

Ostali slučajevi

Ali on je također pronašao primjenu u otkrivanju:

• Trudnoća;
• Autoimune bolesti;
• Alergeni u hrani: kvantitativno određivanje ukupnih imunoglobulina E (IgE) pomaže u procjeni i liječenju alergija;
• Hormonski poremećaji;
• Tumorski biljezi;
• Biljni virusi;
• I još mnogo toga

U sklopu otkrivanja anti-SARS-CoV-2 antitijela, pilot studija koju su u kolovozu 2020. proveli Institut Pasteur, CNRS, Inserm i Sveučilište u Parizu potvrđuje pouzdanost ELISA testa: oba ELISA testa testirala su upotrebu cijeli N protein SARS-CoV-2 (ELISA N) ili izvanstanična domena virusnog šiljka (S) kao ciljni antigeni. Ova tehnika bi omogućila identifikaciju antitijela u više od 90% slučajeva, s vrlo niskom stopom lažno pozitivnih od 1%.

Elisa testovi koji se provode u laboratorijima za analizu na liječnički recept koštaju oko 10 eura, a zdravstveno osiguranje ih nadoknađuje u 100%.

Provedeni u besplatnim centrima za informiranje, probir i dijagnostiku (CeGIDD), mogu biti besplatni za HIV i SARS-CoV-2.