Dijagnoza akromegalije je prilično jednostavna (ali samo kad bolje razmislite), budući da uključuje uzimanje krvi za određivanje razine GH i IGF-1. Kod akromegalije postoji visoka razina IGF-1 i GH, znajući da je lučenje GH normalno povremeno, ali da je kod akromegalije uvijek visoko jer više nije regulirano. Konačna laboratorijska dijagnoza temelji se na testu glukoze. Budući da glukoza normalno smanjuje lučenje GH, oralna primjena glukoze omogućuje da se uzastopnim krvnim pretragama otkrije da kod akromegalije lučenje hormona rasta ostaje visoko.

Nakon što se potvrdi hipersekrecija GH, tada je potrebno pronaći njegovo podrijetlo. Danas je zlatni standard MRI mozga koji može pokazati tumor hipofize. U vrlo rijetkim slučajevima radi se o tumoru koji se nalazi na drugom mjestu (najčešće u mozgu, plućima ili gušterači) koji luči drugi hormon koji djeluje na hipofizu, GHRH, koji potiče proizvodnju GH. Zatim se provodi opsežnija procjena kako bi se otkrilo podrijetlo ove abnormalne sekrecije.